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在生命科學(xué)和藥物研究中,細(xì)胞活性檢測是評估藥物作用、研究疾病機(jī)制的重要手段。其中,CCK-8試劑盒作為一種常用的細(xì)胞活性檢測方法,因其簡便、準(zhǔn)確的特點而被廣泛應(yīng)用。CCK-8試劑盒,全稱為CellCountingKit-8,是一種基于WST-8的試劑盒,用于量化細(xì)胞活性。該試劑盒通過檢測細(xì)胞代謝酶活性來反映細(xì)胞的存活狀態(tài),具有高靈敏度、低背景干擾等特點。首先,CCK-8試劑盒具有簡便易用的優(yōu)勢。與傳統(tǒng)的細(xì)胞活性檢測方法相比,CCK-8試劑盒不需要放射性同位素標(biāo)記,也不需要洗滌...
在生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中,對細(xì)胞活力的準(zhǔn)確評估是至關(guān)重要的。細(xì)胞活力是衡量細(xì)胞生長、增殖和功能的關(guān)鍵指標(biāo),對于藥物篩選、疾病模型構(gòu)建以及再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域具有重要意義。在眾多的細(xì)胞活力評估方法中,CCK-8(CellCountingKit-8)試劑盒因其簡便、靈敏和可靠的特性而受到廣泛應(yīng)用。CCK-8試劑盒基于WST-8[4-(乙基偶氮)-鄰苯二酚]的原理,能夠在活細(xì)胞中代謝生成具有顏色的產(chǎn)物,該產(chǎn)物在一定波長下具有光吸收值。隨著細(xì)胞活力的增加,代謝產(chǎn)物量也隨之增加,因此可以通過測...
在生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中,細(xì)胞增殖與毒性檢測是評估藥物、化學(xué)物質(zhì)或生物因子對細(xì)胞影響的重要手段。CCK-8試劑盒作為一種常用的細(xì)胞增殖與毒性檢測工具,因其簡便、準(zhǔn)確和靈敏度高的特點,成為了科研人員的理想選擇。CCK-8試劑盒利用了WST-8[又稱CCK-8(CellCountingKit-8)]這一水溶性四唑鹽,能夠在活細(xì)胞中進(jìn)行代謝,從而產(chǎn)生可檢測的信號。這種試劑盒通過測量水溶液中存在的電子受體數(shù)量來量化細(xì)胞活性。當(dāng)細(xì)胞增殖時,水溶液中的電子受體數(shù)量會增加,從而可以直觀地反映...
Lipo2000試劑的使用范圍較廣,它不僅可以用于質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染、siRNA表達(dá)載體、雙鏈核糖核酸dsRNA轉(zhuǎn)染,以及RNA等核酸轉(zhuǎn)染,還可以用于文庫篩選的高通量轉(zhuǎn)染。對于細(xì)胞轉(zhuǎn)染Lipo2000幾乎涵蓋了HEK293、CHO細(xì)胞、HeLa等190多種細(xì)胞系。本期內(nèi)容一起來學(xué)習(xí)下Lipofectamine™2000瞬時轉(zhuǎn)染的實驗流程吧!(一)細(xì)胞轉(zhuǎn)染前的準(zhǔn)備:因轉(zhuǎn)染效率依賴于細(xì)胞培養(yǎng)密度,而Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑具有細(xì)胞毒性,使用時需確保高細(xì)胞密度進(jìn)行,建...
ATCC(AmericanTypeCultureCollection)提供了廣泛的細(xì)胞和菌株供科研和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域使用。為了確保細(xì)胞或菌株的長期保存和穩(wěn)定性,以下是一些常見的方法來保存ATCC細(xì)胞或菌株:凍存保存:凍存是常用的細(xì)胞或菌株保存方法之一。將細(xì)胞或菌株分裝到含有適當(dāng)濃度的保護(hù)劑(例如DMSO或甘油)的凍存液中,然后快速冷凍至低溫(通常為-80°C或液氮中的-196°C)。這種方法可以有效地防止細(xì)胞或菌株的代謝活動,延長其保存時間。1.常規(guī)培養(yǎng)保存:某些細(xì)胞或菌株可以通過定...
重組蛋白是利用基因工程技術(shù),將目標(biāo)蛋白的編碼序列克隆到載體中,然后在細(xì)胞中進(jìn)行一系列實驗操作,最終得到具有生物活性的蛋白質(zhì)。重組蛋白在生物學(xué)研究中有很廣泛的應(yīng)用,比如制備抗體、進(jìn)行ELISA實驗、藥物研究、免疫實驗、細(xì)胞培養(yǎng)以及晶體結(jié)構(gòu)分析等。對于生物學(xué)研究來說,重組蛋白的純化是非常重要的一步。純化重組蛋白的方法有很多種,下面介紹幾種常用的方法:親和層析法:利用目標(biāo)蛋白與親和柱上的配體之間的特異性結(jié)合來分離目標(biāo)蛋白。通過調(diào)節(jié)條件,使目標(biāo)蛋白與親和柱上的配體結(jié)合,而其他雜質(zhì)則從...
在生物醫(yī)學(xué)研究中,轉(zhuǎn)染技術(shù)是一種常用的實驗方法,用于將外源性基因?qū)爰?xì)胞中,以研究基因功能、表達(dá)調(diào)控等重要問題。而在這些實驗中,轉(zhuǎn)染試劑的選擇和使用是關(guān)鍵環(huán)節(jié)。其中,PEI(聚乙烯亞胺)線性轉(zhuǎn)染試劑以其高效、安全、易操作等優(yōu)點,得到了廣泛的應(yīng)用。PEI是一種高分子聚合物,具有優(yōu)異的細(xì)胞穿透性和基因轉(zhuǎn)染能力。其工作原理主要是通過與DNA或RNA形成復(fù)合物,保護(hù)它們免受細(xì)胞內(nèi)酶的降解,同時幫助其進(jìn)入細(xì)胞。PEI線性轉(zhuǎn)染試劑與其他轉(zhuǎn)染試劑相比,具有更高的轉(zhuǎn)染效率和更低的細(xì)胞毒性,因...
在生物醫(yī)學(xué)研究中,轉(zhuǎn)染是一種重要的技術(shù),用于將外源基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)。而線性轉(zhuǎn)染試劑,以其高效、安全、易操作等優(yōu)點,逐漸成為了轉(zhuǎn)染研究中的熱門選擇。本文將重點介紹一種名為PEI(聚乙烯亞胺)的線性轉(zhuǎn)染試劑,探討其適用性及廣泛應(yīng)用。PEI是一種具有多個正電荷的聚合物,能與DNA形成絡(luò)合物,從而保護(hù)DNA免受細(xì)胞內(nèi)核酸酶的降解。此外,PEI還能通過形成納米顆粒,將DNA包裹在其中,增加其跨膜能力,從而提高轉(zhuǎn)染效率。這種轉(zhuǎn)染方法具有較高的細(xì)胞適用性,能適用于各種類型的細(xì)胞,包括原代細(xì)胞...