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2×GS Taq PCR混合液用于PAGE,包含高純度GS Taq DNA聚合酶、dNTPs以及優(yōu)化的緩沖體系,濃度為2×, 只需要添加引物、模板和ddH2O即可進(jìn)行PCR擴(kuò)增,適用于常規(guī)PCR及較短DNA片段的PCR擴(kuò)增,專用于聚丙烯酰胺電泳檢測(cè)。 使用本產(chǎn)品擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物3’端帶有一個(gè)突出的“A“堿基,純化后可直接用于TA克隆
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? 操作簡(jiǎn)單:2×Mix,只需要添加引物、模板和ddH2O即可進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本產(chǎn)品包含高純度GS Taq DNA聚合酶、dNTPs以及優(yōu)化的緩沖體系,濃度為2×, 只需要添加引物、模板和ddH2O即可進(jìn)行PCR擴(kuò)增,適用于常規(guī)PCR及較短DNA片段的PCR擴(kuò)增,專用于聚丙烯酰胺電泳檢測(cè)。 使用本產(chǎn)品擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物3’端帶有一個(gè)突出的"A"堿基,純化后可直接用于TA克隆。
產(chǎn)品組成
組分 | 規(guī)格 |
2×GS Taq PCR混合液用于PAGE | 5×1.0 mL |
保存條件
-20℃保存 24 個(gè)月
適用范圍
2×GS Taq PCR混合液用于PAGE適用于常規(guī) PCR 擴(kuò)增及較短 DNA 片段的 PCR 擴(kuò)增,專用于聚丙烯酰胺電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng)
請(qǐng)使用高質(zhì)量的模板進(jìn)行擴(kuò)增;
PCR Mix 應(yīng)避免反復(fù)凍融,短期內(nèi)多次使用可置于 4℃保存。
常見問(wèn)題與解決辦法
Q1:擴(kuò)增無(wú)產(chǎn)物或產(chǎn)物量少?
A1:
1) 模板降解或模板純度差。電泳檢測(cè)模板質(zhì)量,使用高質(zhì)量模板;
2) 模板濃度過(guò)低。適當(dāng)增加模板用量;
3) 引物不合適。優(yōu)化引物設(shè)計(jì);
4) 退火溫度不合適。設(shè)置退火溫度梯度,摸索合適的退火溫度;
5) 循環(huán)數(shù)過(guò)少。適當(dāng)增加 5~10 個(gè)循環(huán);
6) 延伸時(shí)間不足。復(fù)雜模板可適當(dāng)增加延伸速度至 20~30 s/kb。
Q2:擴(kuò)增出現(xiàn)非特異條帶或彌散帶?
A2:
1) 引物特異性差。優(yōu)化引物,避免非特異性條帶以及引物二聚體的擴(kuò)增;
2) 引物濃度過(guò)高。降低引物濃度;
3) 模板過(guò)量或純度差。減少模板量,使用高質(zhì)量模板;
4) 退火溫度過(guò)低。適當(dāng)提高退火溫度或使用 Touchdown PCR 程序;